自拍偷在线精品自拍偷无码专区,国产成人A亚洲精V品无码,FREE性玩弄妇女HD,公交车扒开稚嫩挺进去J

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > 流式細(xì)胞儀檢測樣品的制備方法

流式細(xì)胞儀檢測樣品的制備方法

 更新時(shí)間:2022-01-14 點(diǎn)擊量:1637
  流式細(xì)胞檢測樣品推薦制備方法:
 
  A. 直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體):
 
  (1) 、收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
 
  (2) 、用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
 
  (3) 、用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
 
  (4) 、用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
 
  B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
 
  (1)、收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
 
  (2)、用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
 
  (3)、用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
 
  (4)、加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
 
  (5)、加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
 
  (6)、加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測。
 
  (7)、流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
 
  C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
 
  (1)、待測樣本制成單細(xì)胞懸液,然后2000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,棄上清。
 
  (2)、用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小時(shí)。
 
  (3)、調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
 
  (4)、PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
国产乱码精品一区二区三区久久| 欧美性巨大╳╳╳╳╳高跟鞋| 国产精品毛片AV一区二区三区| 色噜噜狠狠狠狠色综合久一| 日韩精品无码人妻一区二区三区 | 久久99精品久久久大学生| 精品人妻无码一区二区三区性| 国产午夜福利视频在线观看| 国精品无码人妻一区二区三区 | 国产熟女一区二区三区五月婷| 亚洲色大成网站WWW| 中文精品久久久久人妻不卡| 亚洲熟妇AV一区二区三区漫画| 久久久久亚洲精品无码网址色欲 | 成人污污污WWW网站免费直播| 免费午夜爽爽爽WWW视频十八禁 | 色戒在线免费观看| av无码久久久久久不卡网站| 色88久久久久高潮综合影院| GOGO全球高清大胆国模| 国偷自产一区二区免费视频 | 最近最新手机中文大全10| 国产精品久久毛片| 淫荡少妇白洁| 精品无码三级在线观看视频| 欧美性xxxxx极品娇小| 伊人久久大香线蕉av桃花岛| 局长含了一整晚我的奶头| 国精品无码一区二区三区在线| 国产精品久久午夜夜伦鲁鲁| 曰批视频免费40分钟试看| 又粗又爽高潮午夜免费视频| 少妇作愛爽到呻吟69XX| 日本丰满熟妇BBXBBXHD| 天堂中文8资源在线8| 久久九九久精品国产免费直播| 丰满大爆乳波霸奶| 内射人妻无码色AV无码| 中文字幕AⅤ人妻一区二区| AV无码久久久久不卡蜜桃| 超级METART全部裸体欣赏|